Окраска бактерий
по граму
Оборудование: культура бактерий, предметные стекла, стакан с водой и пипетка, бактериальная петля, спиртовка, фен (для подсушивания мазков), пинцет,набор реактивов для окраски по Граму, пластиковая чашечка для смыва красителей, спирт и вода с пипетками для промывания мазков, микроскоп.
Предварительная подготовка:
Необходимо продумать какую культуру бактерий предполагается красить. Возможные варианты:
- сделать зубочисткой соскоб с зубов и растворить зубной налет в небольшом количестве (не более 1 мл) холодной кипяченой воды;
- купить ацидофилин дмитровского молочного комбината, взять 1 каплю ацидофилина и растворить в 1 мл воды;
- оставить в закрытой емкости немного куриного бульона на батарее или в термостате на 2 суток;
- сварить МПА (мясо-пептонный агар), на застывшую среду поставить отпечатки пальцев. Растить в термостате 2 суток при t 34-35 градусов.
Учащихся нужно познакомить с информацией об отличиях грамположительных и грамотрицательных бактерий.
Общую информацию о бактериях можно взять ЗДЕСЬ
Методика выполнения работы:
ПРИГОТОВЛЕНИЕ МАЗКА
1. Обезжирить предметное стекло ваткой со спиртом.
2. Нанести каплю воды
3. Простерилизовать бактериальную петлю (металлическую - прокаливанием, пластмассовую - спиртом)
4. Легким касанием взять петлей бактериальный материал.
5. Внести в каплю бактерий бактериальной петлей.
6. Высушить каплю на стекле феном
7. Зафиксировать препарат пламенем горелки (3 раза провести стекло над пламенем)
ОКРАШИВАНИЕ
1. На мазок капнуть генциановый фиолетовый.
Ждать 1 минуту
2. В капли генцианового фиолетового капнуть раствор Люголя. Ждать 30 сек
3. Смыть краску со стекла спиртом. (не смывайте в раковину, ее потом не отмыть!)
4. Промыть стекло водой
Окрасились грамположительные бактерии.
5. Капнуть фуксин. Ждать 1 мин.
6. Промыть водой.
Окрасились грамотрицательные бактерии.
НАШИ МИКРОПРЕПАРАТЫ:
Грамположительные бактерии.
грамотрицательные бактерии.