КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА БЕЛОК | | Подготовка реагента Бенедикта | | 1. Растворяем 12 г лимонной кислоты в 30 мл воды. | | 2. Растворяем 6 г гидроксида натрия (каустическая сода) в 30 мл воды. | | 3. Смешиваем растворы, добавляя небольшими порциями второй раствор к первому. | | 4. Растворяем в полученном растворе 10 г карбоната натрия (кальцинированная сода) | | 5. Добавляем 2 г сульфата меди (пентагидрат), растворенного в 10 мл воды | | 6. Доводим объем раствора до 100 мл. | | Приготовление 6% раствора NaOH | | 1. Растворить 6 г NaOH тв. в воде, объем довести до 100 мл. | | Проведение качественных реакций с различной концентрацией белка в растворе. | | Если количество белка в использованном для качественных реакций образце известно, то полученные окрашенные пробы можно использовать для количественного определения содержания белка в других растворах. | | Качественные реакции на белок. | | Приготовить в штативе 10 пробирок и автоматическую пипетку для отбора проб от 50 до 500 мкл. Смешать в пробирках растворы согласно приведенной ниже таблице. Полученные цветовые пробы показывают зависимость между интенсивностью окрашивания и количеством белка в пробах. | |
Раствора БСА (бычьего сывороточного альбумина), мкл | 0 | 50 | 75 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 | H2O, мкл | 500 | 450 | 425 | 400 | 350 | 300 | 250 | 200 | 100 | 0 | 6% NaOH, мкл | 500 | 500 | 500 | 500 | 500 | 500 | 500 | 500 | 500 | 500 | реактив Бенедикта, мкл | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | Количество белка в данном объеме БСА, мг | 0 | 0,1 | 0,15 | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | 0,6 | 0,8 | 1 |
|
|