КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ БЕЛКА

 КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА БЕЛОК 
 Подготовка реагента  Бенедикта 
 1. Растворяем 12 г лимонной кислоты в 30 мл воды. 
 2. Растворяем 6 г гидроксида натрия (каустическая сода) в 30 мл воды. 
 3. Смешиваем растворы, добавляя небольшими порциями второй раствор к первому. 
 4. Растворяем в полученном растворе 10 г карбоната натрия (кальцинированная сода) 
 5. Добавляем 2 г сульфата меди (пентагидрат), растворенного в 10 мл воды 
 6. Доводим объем раствора до 100 мл. 
 Приготовление 6% раствора NaOH 
 1. Растворить 6 г NaOH тв. в воде, объем довести до 100 мл. 
 Проведение качественных реакций с различной концентрацией белка в растворе. 
 Если количество белка в использованном для качественных реакций образце известно, то полученные окрашенные  пробы можно использовать для количественного определения содержания белка в других  растворах. 
 Качественные реакции на белок. 
 Приготовить в штативе 10 пробирок и автоматическую пипетку для отбора проб от 50 до 500 мкл. Смешать в пробирках растворы согласно приведенной ниже таблице. Полученные цветовые пробы показывают зависимость между интенсивностью окрашивания и количеством белка в пробах. 
 Раствора БСА (бычьего сывороточного альбумина), мкл 0 50 75 100 150200  250300 400  500
 H2O, мкл500  450 425 400350 300 250 200  100 0
 6% NaOH, мкл 500500 500  500 500 500500  500 500500 
 реактив Бенедикта, мкл 5050  5050 50  50 50 5050  50
 Количество белка в данном объеме БСА, мг 0 0,1 0,150,2 0,3 0,4 0,5 0,6  0,8 1

Comments